Existem cinco classes de imunoglobulinas humanas empregadas para tratamentos utilizando anticorpos terapêuticos recombinantes e, dentre estas, as subclasses IgG1, IgG2 e IgG4 tem sido as mais utilizadas para tratamentos humanos devido à sua meia-vida sérica.¹ A cromatografia de troca aniônica (do inglês, anion exchange chromatogaphy – AEX) tem sido amplamente empregada como alternativa à cromatografia de troca catiônica para a análise de proteínas relativamente ácidas (pI<8).

Tendo isso em vista, a YMC divulgou aplicações evolvendo a análise de anticorpos monoclonais IgG4 empregando a técnica de AEX, utilizando coluna de troca aniônica (SAX) BioPro IEX QF, acoplada a detectores de espectrometria de massas (MS), obtendo excelentes resultados.

A coluna de troca aniônica BioPro IEX QF corresponde a uma coluna de matriz polimérica não porosa hidrofílica com ancoragem de grupos catiônicos de sal de amônio quaternário adequada para caracterização de produtos biofarmacêuticos e controle de qualidade, obtendo resolução, eficiência e rendimento adequados com baixa pressão operacional. Ademais, as colunas BioPro tem demonstrado ser ótimas opções para o desenvolvimento de métodos de separação/purificação seguida de detecção por espectrometria de massas.

Abaixo é possível verificar as condições cromatográficas e o cromatograma no qual é observada a separação de três variantes básicas e duas variantes ácidas provenientes da mesma espécie.

• Referências:
  1. Tang, Y., Cain, P., Anguiano, V., Shih, J. J., Chai, Q., Feng, Y. Impact of IgG subclass on molecular properties of monoclonal antibodies. Taylor & Francis Group, v13(1), 2021.
  2. Charge heterogeneity characterization of an IgG4-based mAb using AEX couple to MS. Nota aplicação YMC.
  3. Utilisation of AEX-MS for charge variant analysis of IgG4-based mAbs! Nota aplicação YMC.
  4. Native AEX-MS analysis of IgG4-based mAbs. Nota aplicação YMC.