A Tosoh Biosciences oferece uma linha completa para a separação e purificação de biomoléculas. Sabe-se que o processo de purificação pode envolver uma sucessão de etapas sendo que cada uma delas utiliza um modo de separação diferente baseado em interações específicas entre a fase estacionária e a biomolécula.

Os vários modos de separação estão fundamentados em interações físicas, químicas ou biológicas da molécula alvo, como tamanho, presença ou não de cargas e hidrofobicidade. Assim, o conhecimento sobre tais características é de grande importância para a melhor escolha da técnica a ser empregada. Dentre as principais, podemos destacar:

Cromatografia de afinidade – baseada na adsorção específica da molécula ao ligante ou macromolécula presente na fase estacionária. A biomolécula é eluida por meio da aplicação de um gradiente de pH ou força iônica da fase móvel.

Cromatografia por modo misto – a separação ocorre por meio do emprego de uma fase estacionária que contém tanto grupos iônicos como hidrofóbicos. Por apresentar tais características, deve-se ter grande atenção durante o desenvolvimento do método, haja vista que a força iônica e o pH possuem um impacto não linear na ligação e eluição da molécula alvo.

Cromatografia de troca iônica – por normalmente apresentarem cargas em sua superfície, a separação de biomoléculas por esta técnica se fundamenta na ligação da molécula alvo com a carga oposta presente na fase estacionária. Sua eluição ocorre através da mudança do pH e/ou da concentração de sal da fase estacionária.

Cromatografia de interação hidrofóbica – o princípio desta técnica é a interação do bioanalito com uma fase estacionária hidrofóbica e uma fase móvel de alta concentração de sais. Com a redução da força iônica da fase móvel, a interação analito-fase estacionária é alterada, permitindo sua eluição. Entretanto, mesmo em altas concentrações de sais, a atividade biológica da biomolécula se mantém.

Cromatografia por exclusão de tamanho – método no qual os componentes da mistura são separados através da diferença do seu volume hidrodinâmico (tamanho molecular). Corresponde à um método meramente físico, no qual moléculas maiores não conseguem penetrar nos poros da fase estacionária, logo, são primeiramente eluidos.

A Vede Analítica, em parceria com a TOSOH Biociences, oferece todo o suporte para a escolha da melhor técnica para separação e purificação de biomoléculas. Contamos com resinas e colunas para todos os modos de cromatografia líquida supracitados.

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