A derivatização é um processo que envolve uma reação química ou bioquímica que pode ser feita antes da injeção (derivatização pré coluna) ou depois da injeção, e consequentemente, depois da cromatografia (derivatização pós coluna). A derivatização de um açúcar pode ser realizada com vários reagentes a depender do tipo de equipamento ou modo cromatográfico que se deseja utilizar, podendo ir desde uma permetilação, que exige um trabalho com LC-MS até uma derivatização com TMS para trabalhos em GC.

No paper que trazemos hoje, utilizou-se a 1-fenil-3-metil-5-pirazolona (PMP) como reagente. A PMP se apresenta como um derivatizante potencialmente interessante por se tratar de um composto dotado de grupos cromóforos, que permitiria a detecção de açúcares redutores em uma configuração simples de HPLC-DAD com uma sensibilidade sub-nM.

Utilizaram para esta aplicação a coluna YMC-Pack ODS-AQ, que conta com um empacotamento de alta tecnologia constituído de partículas de sílica inorgânica funcionalizadas com grupos C18 e finalizadas com um revestimento de endcapping para eliminação de interações secundárias indesejadas.

A coluna AQ é compatível com fases 100% aquosas, potencialmente tendo sido contemplada como opção devido à natureza dos analitos de interesse (mesmo não tendo sido necessário trabalhar com uma condição tão fraca assim de força de eluente). Ela conta com um equilíbrio importante de interações intermoleculares de natureza hidrofóbica e hidrofílica. Este é um produto da sua química de superfície e da sua densidade de ligantes, o que a confere seletividade única. Como o próprio autor menciona, a YMC-Pack ODS-AQ foi a escolha dentre testes envolvendo 6 colunas C18, 2 NH2 e 2 Phenyl.

A Verde Analítica fornece uma variada linha de colunas da marca YMC, clique no link abaixo e conheça o portfólio completo:

Ref. Gonzalez NM, Fitch A, Al-Bazi J. Development of a RP-HPLC method for determination of glucose in Shewanella oneidensis cultures utilizing 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone derivatization. PLoS One. 2020 Mar 12;15(3): e0229990. doi: 10.1371/journal.pone.0229990. PMID: 32163461; PMCID: PMC7067395.