Quantificação de anfetaminas em urina utilizando SiliaPrepX HLB
AEX-MS para análise de variantes de carga de mAbs baseados em IgG4
12 de novembro de 2025Quantificação de anfetaminas em urina utilizando SiliaPrepX HLB
As anfetaminas são substâncias psicoestimulantes consumidas por diferentes motivos. Medicinalmente, podem ser usadas no tratamento do Transtorno de Déficit de Atenção e Hiperatividade (TDAH) e da narcolepsia, enquanto seu uso recreativo é motivado pelos efeitos eufóricos, como ocorre com a metanfetamina. Além disso, alguns atletas recorrem a essas substâncias para melhorar o desempenho físico, prática totalmente ilegal e potencialmente perigosa.
Devido à diversidade de usos e ao risco associado ao consumo não autorizado, a detecção eficiente de anfetaminas em fluidos biológicos é fundamental, principalmente em urina, onde a concentração dos analitos permite análises confiáveis.
Nesta nota de aplicação, demonstrou-se que o cartucho SiliaPrepX HLB da Silicycle é altamente eficaz na preparação de amostras de urina para análise de anfetaminas, proporcionando recuperações consistentes e altas, mesmo em matrizes complexas.
O cartucho SiliaPrepX HLB
O SiliaPrepX HLB é um copolímero umedecível que apresenta um Equilíbrio Hidrofílico-Lipofílico (HLB), permitindo uma retenção eficiente de compostos neutros, ácidos e básicos. Além disso, oferece alta estabilidade em solventes orgânicos, sendo ideal para métodos que envolvem eluição em múltiplos solventes e reconstituição em misturas aquosas e orgânicas. Sua tecnologia HLB garante versatilidade para diferentes classes de analitos e robustez para análises reprodutíveis.
Anfetaminas analisadas
As principais anfetaminas monitoradas em análises toxicológicas de urina foram extraídas usando o cartucho SiliaPrepX HLB, incluindo: anfetamina, metanfetamina, fentermine, MDA, MDEA e MDMA (Figura 1).
Procedimento de preparo da amostra
O preparo das amostras de urina foi realizado seguindo etapas sequenciais detalhadas na Tabela 1:
Tabela 1: Extração de anfetaminas usando cartucho SiliaPrepX HLB
| CARTUCHO | SiliaPrepX HLB, polímero, 60 mg, 3 mL, 40 µm, 110 Å |
| PN | SPE-P0002-03BB |
| PRÉ-TRATAMENTO DA AMOSTRA | Adicionou-se 100 μL de TFA a 10 mL de urina |
| CONDICIONAMENTO | 3 mL de metanol |
| EQUILIBRIO | 3 mL de água |
| CARREGAMENTO | 1 mL da amostra de urina passou lentamente pelo cartucho |
| LAVAGEM | 1- 3 mL de metanol/água (5/95) com 2 % NH4OH
2- 3 mL de metanol/água (20/80) com 2 % NH4OH 3- 1 mL de metanol/água (80/20) |
| ELUIÇÃO | 1- 3 mL de metanol
2- 3 mL de ácido fórmico 2 % em metanol |
| RECONSTITUIÇÃO | Evaporação sob fluxo de nitrogênio (20 minutos a 40 °C), reconstituição com 3 mL de metanol/água (70/30) e quantificação por LC/MS |
Após a reconstituição, as amostras foram analisadas por HPLC utilizando uma coluna C18, e os resultados de recuperação estão apresentados na Tabela 2.
Tabela 2: Recuperação de anfetaminas
| Anfetaminas | Recuperação (%) |
| Anfetamina | 92 |
| Metanfetamina | 93 |
| Fentermine | 99 |
| MDEA | 95 |
| MDA | 86 |
| MDMA | 93 |
Conclusão
Os cartuchos SiliaPrepX HLB demonstraram alta eficiência na extração de anfetaminas em urina, oferecendo altas recuperações, robustez e reprodutibilidade, mesmo para matrizes complexas. A tecnologia HLB do copolímero umedecível garante retenção confiável de compostos com propriedades químicas variadas (neutros, ácidos e básicos), estabilidade em solventes orgânicos e compatibilidade com métodos de eluição sequenciais. Isso torna o SiliaPrepX HLB uma escolha ideal para análises toxicológicas precisas e consistentes de anfetaminas em fluidos biológicos.
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