Enquanto a fase reversa é o modo de retenção mais usado em HPLC, compostos muito polares frequentemente não são retidos suficientemente em fases com baixo teor orgânico, ou mesmo em fases móveis 100% aquosas.
Com o uso de uma coluna de fase amino ou amida, compostos polares podem ser retidos por interações de fase normal, ou por cromatografia de interações hidrofílicas (HILIC), mecanismo de retenção que usa uma fase móvel composta de uma mistura de acetonitrila e tampão de acetato de amônia. Ao contrário do comportamento de retenção em fase reversa, em modo HILIC os solutos serão retidos por mais tempo ao se aumentar a porcentagem de acetonitrila.
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